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Morfología
Bacteriana |
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Coco: esférica; pueden agregarse en pares (diplococo),
en cadena (estreptococo), en racimos (estafilococo),
en tétrada o sarcina.
Bacilo: en forma de bastoncillo; puede tender a ser
esférico (cocobacilo) o alargado (bacilo fusiforme).
Espirilo: en forma helicoidal
Vibrio
Espiroqueta: en forma de tirabuzón |
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Tinción de Gram |
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Primer colorante (cristal violeta): básico, en contacto
con las bacterias cargadas negativamente reacciona
coloreándolas.
Solución mordiente (Yodo de Gram): fija las tinciones y
aumenta la afinidad entre el colorante y las bacterias.
Agente decolorante (alcohol-acetona): disolvente orgánico
que se utiliza como lavado para eliminar colorante no fijado.
Colorante de contraste (safranina): colorante básico de
distinto color al primer colorante.
Bacterias Gram (+) se tiñen de púrpura por el cristal
violeta y retienen la coloración por su gruesa capa de
peptidoglicanos.
Bacterias Gram (-) perderán la coloración inicial del
cristal violeta por su delgada capa de peptidoglicanos y se
teñirán de rojo debido a la safranina.
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Tinción de
Anthony |
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Las cápsulas no se tiñen normalmente con colorantes básicos como
el cristal violeta o la safranina.
Tinción negativa de cápsulas en que la leche litmus se tiñe
con violeta cristal como contraste de un fondo morado con
el halo transparente de la cápsula incolora. |
OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Tinción de
Möeller |
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Las esporas permiten a las bacterias pasar a un estado latente
en condiciones ambientales adversas. Su principal componente es
Ca2+ fijado a ácido dipicolínico.
El calor después de la tinción con carbol-fuscina
con permite que rompa la estructura que protege la espora para
que así pueda penetrar el colorante.
Con el lavado de agua se retira todo tinte que se adhirió
a la bacteria, para después teñirse con azul de metileno.
Resalta de color rojo la espora y de color azul,
la bacteria. |
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Método
de estrías y vertido |
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El método de estrías es el más utilizado para el
aislamiento de colonias bacterianas. Método rápido y simple
de agotamiento progresivo y continuo del inóculo sobre un medio
sólido para obtener un número reducido de bacterias distribuidas
individualmente sobre la superficie de la placa de Petri que al
incubar, cada una originará una colonia.
El método de vertido es el más utilizado para el
recuento bacteriano, es importante el conteo de colonias
para conocer la velocidad con que se reproducen y calcular el
número de bacterias por volumen de solución (UFC:
unidades formadoras de colonias). |
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Antibiograma
Método de difusión en plato |
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La bacteria inoculada se enfrenta sobre la superficie del medio
de agar a una solución antibiótica absorbida en discos
de papel de filtro o en pastillas.
El medio de cultivo más frecuentemente empleado es el de
Müeller-Hinton. Su pH debe estar entre 7,2-7,4 y grosor
entre 4-6 mm. El inóculo bacteriano debe tener una turbidez
similar al 0,5 de la escala de McFarland y la inoculación se
debe efectuar con hisopo de algodón estéril. La lectura se
realiza entre 18-24 h, adecuado únicamente para bacterias
patógenas de rápido crecimiento. |
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Antibiograma
Método de dilución en plato |
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Los métodos de dilución pueden realizarse en medio sólido (en
agar) o en medio líquido (en caldo). La adaptación a
microplatos de 96 pocillos utilizando volúmenes de
50-200 uL permite testar un gran número de antibióticos de
forma sencilla, rápida y económica. |
OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS
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Antibiograma
E-test |
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Técnica que combina los métodos de difusión en agar y
dilución para determinar la CIM.
La sistemática es similar al método de difusión en agar pero en
lugar de discos utiliza tiras de Etest.
Estas tiras contienen un gradiente del antimicrobiano en la
superficie inferior que difunde en el agar estableciendo un
gradiente continuo del mismo a lo largo de la tira. Después de
la incubación se forma una zona elíptica de inhibición del
crecimiento y la CMI corresponde con el punto donde el área
de inhibición del crecimiento intersecciona con la tira.
CIM (concentración inhibitoria mínima): menor
concentración de antimicrobiano capaz de inhibir el
desarrollo de una cepa bacteriana dada.
CBM (concentración bactericida mínima): menor
concentración de antimicrobiano capaz de destruir una
cepa bacteriana dada. |
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OTRAS TÉCNICAS
BACTERIOLÓGICAS

