Las esporas permiten a las bacterias pasar a un estado latente en condiciones ambientales adversas. Su principal componente es Ca2+ fijado a ácido dipicolínico.
El calor después de la tinción con carbol-fuscina con permite que rompa la estructura que protege la espora para que así pueda penetrar el colorante.
Con el lavado de agua se retira todo tinte que se adhirió a la bacteria, para después teñirse con azul de metileno.
Resalta de color rojo la espora y de color azul, la bacteria.
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